Al fine di valutare il ruolo dei geni delle citochine e delle molecole di adesione nel rigetto cronico e o nella tolleranza al trapianto saranno analizzati i polimorfismi genici delle citochine IL-10, IL-6, IFN-gamma, TNF-alfa, TGF-beta, della catena alfa del recettore dell’IL-4, e della molecola di adesione intercellulare ICAM-1 in riceventi di trapianto cardiaco. La popolazione dei soggetti comprenderà 200 riceventi di trapianto cardiaco e rispettivi donatori selezionati dalla Clinica Cardiochirurgica dell’Università di Verona (prof. Mazzucco, prof. Faggian). Verranno studiati pazienti con rigetto cronico o pazienti senza rigetto cronico (gruppo di controllo).La diagnosi di rigetto cronico verrà effettuata mediante coronarografia. Saranno raccolti dati sul donatore e sul ricevente: età, sesso, durata del trapianto, numero di mismatches HLA,numero di episodi di rigetto acuto, terapia farmacologica.
ANALISI MOLECOLARI DEL DNA
1) Preparazione del DNA genomico dal campione disangue periferico di ogni soggetto.
2) Analisi dei seguenti polimorfismi genici:
TGF-beta (arg25pro, leu10pro)
IL-10 (-1082G/A, -819C/T, -592C/A)
IL-6 (-174G/C)
IFN-gamma (874T/A)
TNF-alfa (-308G/A)
IL-4Ralfa (Q576R)
ICAM-1 (G214R, E469K)
L’analisi di ulteriori polimorfismi in questi geni o in altri geni potrà essere aggiunta nel corso di questa ricerca, in relazione a dati che emergono da questo studio o da nuovi dati di letteratura. La genotipizzazione verrà condotta mediante tecniche di amplificazione del DNA e analisi con enzimi di restrizione. Alcuni tra i polimorfismi sopracitati sono stati già da noi utilizzati per uno studio sulla componente genetica dell’asma atopica e delle malattie cardiovascolari, e per uno studio sul rigetto cronico del trapianto renale.
